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采用WBP全身體積描記系統(tǒng)評價肺病理變化

更新時間:2022-01-18      點擊次數:2521

呼吸系統(tǒng)是由呼吸道(鼻、咽、喉、氣管、支氣管)和肺泡所組成。人體透過外呼吸(肺呼吸)和內呼吸(組織呼吸)完成新陳代謝的需要,與心血管系統(tǒng)有著密切的聯(lián)系。肺臟除了主管呼吸功能外還具有防御、免疫及內分泌代謝功能。

    而肺部炎癥(感染性/非感染性)可直接導致肺部多種病變,包括粘液的產生、炎癥細胞的集結和氣道高反應(AHR)等。通過直接侵入性手段(如機械通氣)或間接的無創(chuàng)手段,如使用全身體積描記系統(tǒng)(Whole-Body Plethysmograph,WBP)測量氣道高反應,可評估炎癥性肺病動物模型中,肺部炎癥的嚴重程度。雖然直接測量氣道高反應被認為是評估氣道力學的最準確的方法,但從無創(chuàng)手段WBP中獲得的所有參數分析同樣可以得出令研究人員滿意的結果。


來自馬薩諸塞州波士頓波士頓大學醫(yī)學院病理學系的研究者Louis J. Vaickus等人曾發(fā)表過關于通過無創(chuàng)手段詳細檢測呼吸功能以評估肺病理變化的文章,相關成果發(fā)表在《The American Journal of Pathology》期刊。其研究團隊直接采用了全身體積描記系統(tǒng)(WBP)對實驗鼠進行了全面的呼吸參數檢測并進行一系列的跟蹤治療研究,研究結果表明經地塞米松(Dexamethasone)治療后,哮喘小鼠的肺功能獲得明顯改善。總之,詳細的WBP參數的測定助力于準確地評價實驗動物的肺部病理變化和呼吸健康。該研究對于呼吸類藥物的開發(fā)及治療研究,有著重要的參考借鑒價值,并有助于指導各種深入性研究。


 


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該研究團隊使用了全身體積描記系統(tǒng)(WBP)比較了兩組經蟑螂過敏原致敏(CRA)的小鼠的呼吸參數。其中一組在最后激發(fā)時使用了地塞米松(Dexamethasone)治療哮喘癥狀組(Dex-Asthma組),另一組則為載體對照組(Asthma組)。 

過敏原致敏:CRA,是為德國蟑螂Blattella germanica的凍干全身提取物。研究團隊在無菌PBS溶液中重組了CRA,用酶聯(lián)免疫吸附法測定Blag1和Blag2組分的濃度。溶液濃度進行了調整,使50µl溶液含有8µg合并的Blag1和Blag2。研究團隊于免疫(第0天)和2次過敏原激發(fā)(第14天和第21天)通過氣管內給藥,藥物CRA溶液隨即被實驗鼠吸入。免疫劑量為1:2稀釋儲備液,激發(fā)劑量則為1:4稀釋儲備液,分別含有4µg和2µg合并的Blag1和Blag2。

 地塞米松和載體治療:在100µl無菌水中,對Dex-Na?ve組和Dex-Asthma組小鼠腹腔內注射2.5mg/千克水溶性地塞米松。在Dex-Asthma組最終激發(fā)前2小時注射給藥(AHR測量前26小時),AHR測量和犧牲2小時前再次注射給藥。在Dex-Na?ve組小鼠中,分別在AHR測量和犧牲26小時之前和2小時之前注射給藥。Asthma組小鼠接受了兩次與Dex-Asthma小鼠組同時進行的100µl無菌水注射。

呼吸測量:在最后一次激發(fā)的后24小時,Dex-Asthma組和Asthma組小鼠被放置在無約束的全身體積描記器中,并暴露于25mg/ml PBS、或50mg/ml乙酰甲膽鹼的2分鐘霧化中,緊接著采用WBP全身體積描記系統(tǒng)進行5分鐘的記錄。Na?ve組小鼠則與其他組小鼠在一天的同一時間進行評估。所有呼吸參數由WBP同時采集、自動記錄和導出,過程中無人為操作和干預。

采用全身體積描記系統(tǒng)(Whole-Body Plethysmograph,WBP)長期跟蹤藥物治療效果,評價小鼠經過敏原致敏和治療過程前后的詳細肺功能的變化。實驗主要采用了幾個指標,即呼吸頻率、潮氣量、分鐘通氣量、呼氣時間、呼氣流量峰值、吸氣時間、吸氣流量峰值、吸氣間歇Penh。潮氣量(Tidal volume,TV)是平靜呼吸時每次吸入或呼出的氣量。每分鐘通氣量(minute ventilation volume, MV),是指每分鐘進或出肺的氣體總量,為潮氣量與呼吸頻率的乘積。呼氣流量峰值(peak expiratory flow ,PEF), 又稱最大呼氣流量,是指用力肺活量測定過程中,呼氣流量最快時的瞬間流速。Penh則是氣道阻力的間接評價指標。
   


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全身體積描記系統(tǒng)(WBP)所得出的呼吸參數顯示,Dex-Asthma組小鼠進入了代償機制以維持高分鐘通氣量,而Asthma組小鼠在分鐘通氣量參數中表現(xiàn)出明顯的損傷,即便呼氣流量峰值PEF有所增加(103±5毫升/分鐘對比69±70毫升/分鐘)。WBP數據表明,Dex-Asthma組小鼠的氣體交換增強是由于氣道粘液產生的顯著減少所致。組織學切片定量形態(tài)計量學的其他研究進一步證實了此藥物降低了氣道粘液的產生。


全身體積描記系統(tǒng)(Whole-Body Plethysmograph,WBP)作為無創(chuàng)檢測動物肺功能的一種經典方式,避免了麻醉及氣管插管測試對動物造成的直接損傷,可以對各種肺部疾病模型動物的肺功能指標進行長期跟蹤研究。測量指標如潮氣量、分鐘通氣量、呼氣峰值流速、吸氣峰值流速、呼吸頻率、Penh等。這些數據和臨床的數據可以建立直接的相關性,適用于各種肺部疾病及其藥物開發(fā)的研究。


 


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塔望科技在同類進口產品上升級整合,開發(fā)出集成化更高的全身體積描記系統(tǒng),使操作最簡化。目前該系統(tǒng)已被用于睡眠呼吸研究、哮喘研究、藥物評價、毒性研究等。具有不同規(guī)格的體積描記器,適用于小鼠、大鼠、犬、猴等動物。

塔望科技全力支持研究者對肺部疾病的研究,若有需求可以聯(lián)系我們。



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